Анализ гепатит с количественный анализ

Анализ гепатит с количественный анализ

Вирус гепатита С (ВГС) – является РНК-содержащим вирусом из семейства Flaviviridae. Эта инфекция способна размножаться в клетках крови (моноцитах, нейтрофилах, В-лимфоцитах и макрофагах), а также поражать клетки самой печени – гепатоциты. Благодаря высокой степени мутационной активности данный тип гепатита способен избегать воздействия иммунной системы человека.

Есть 11 генотипов и масса субтипов такого вируса, которые отличаются степенью поражения печени и влияют на сроки лечения гепатита. Подобное разнообразие гепатита С требует различных методик противовирусной терапии. К примеру, гепатит 1-го и 4-го генотипов необходимо лечить 48 недель, а для курса терапии против вирусов 2-го и 3-го видов может потребоваться лишь 24 недели.

После того, как экспресс-тест на гепатит С дал положительный результат, проводят анализ ПЦР с целью выявления РНК данного вируса в пробах крови.

ПЦР-диагностика

Полимеразной цепной реакцией (ПЦР) называется экспериментальная методика для выявления вирусов. Такой анализ на гепатит С позволяет существенно увеличить концентрацию некоторых фрагментов ДНК или РНК вируса в сданных пробах. Это дает возможность их распознать и даже подсчитать количество.

кровь с пальца

Данный тест на гепатит С выполняют по следующей методике:

  1. Проба крови (генетический материал), который может содержать искомый ген гепатита, вносится в пробирку. К ней помещают специальные вещества – праймеры, они представляют собой отрезки небольшой длины из искомого гена, которые синтезированы химическим путем. В данный сосуд также добавляется ДНК или РНК полимераза, она способна выстраивать цепочки из нуклеиновой кислоты, полностью идентичные первоначальной. К полученному составу добавляется и подборка из свободных нуклеотидов, являющихся особым строительным материалом для ДНК и РНК, причем один из них содержит мельчайшие частицы из радиоактивного фосфора.
  2. Полученная смесь вначале подогревается до 95 градусов, вследствие чего переплетенные в обычном состоянии обе спирали ДНК из-за такого воздействия расплетаются.
  3. Для продолжения анализа препарат охлаждается, в этот момент праймеры прикрепляются к искомому участку генома вируса гепатита, не позволяя ДНК сформироваться в двойную спираль. Когда происходит остывание смеси, полимераза отыскивает именно одиночные цепочки из нуклеотидов. Во время прикрепления данного фермента он скользит по цепи ДНК (как блок по веревке), а на двойной спирали он не способен «работать», для этого и проводят подогрев смеси.
  4. Чтобы продлить анализ, выполняют повторное нагревание, которое вновь приводит к разделению цепочек нуклеотидов. При выполнении таких циклов ПЦР в пробе количество искомых генов гепатита возрастает в геометрической пропорции, а остальные генетические материалы продуцируются (формируются) лишь в линейной закономерности.
  5. Для завершения исследования проводят очистку раствора от остаточных частиц нуклеотидов. Их разделяют с помощью электрофореза, при этом происходит отделение по параметрам молекулярной массы цепочек ДНК. Такие анализы на гепатит с при помощи ПЦР позволяют определить, присутствуют искомые гены вируса в исследуемом образце или нет.

нагревание частиц

Достоинством данного теста является очень высокий порог чувствительности реакции ПЦР. Такой методике для проведения диагностики, в идеальном варианте, требуется всего одним геном вируса на всю пробу.

Кроме того, такая ПЦР полностью специфична. В каждом из генов есть уникальная последовательность из нуклеотидов, которая, как отпечаток пальца, не может нигде повторяться. Для этого анализа на гепатит С праймеры синтезируются таким образом, чтобы они абсолютно соответствовали уникальным участкам искомых генов, которых нет ни у одной другой последовательности.

Данная методика позволяет также провести анализ на гепатит в с и детерминировать их, помогая установить окончательный диагноз.

Такой лабораторный анализ позволяет получить информацию большую, чем просто наличие или отсутствие РНК вируса гепатита С либо другого типа в пробах крови. Определяя параметр радиоактивного излучения, существует и возможность выявлять, сколько искомого генетического материала изначально находилось в исследуемом образце. Это позволяет определить параметр так называемой вирусной нагрузки – концентрации частиц РНК гепатита в определенном объеме.

Качественный анализ ПЦР

Данный анализ позволяет определить факт наличия вируса гепатита в пробах крови. Его необходимо проводить для всех людей, у которых были обнаружены антитела к гепатиту.

колбы с анализами

В результате проведения такого исследования могут быть только два значения:

  • «Обнаружено». Такой положительный результат теста интерпретируется следующим образом: в анализируемом образце из биологического материала были найдены фрагменты РНК вируса гепатита. Из этого следует, что был факт инфицирования пациента данным вирусом. Это может свидетельствовать о том, что возбудитель гепатита размножается в организме и заражает новые клетки, разрушая печень.
  • «Не обнаружено». Этот результат говорит, что в образце, который анализировался в данной лаборатории, не были обнаружены фрагменты РНК, которые специфичны для вируса гепатита С. Есть также вероятность, что концентрация РНК вируса-возбудителя в исследуемом образце была настолько мала, что тест не смог ее выявить. В таких случаях говорят, что уровень концентрации находится ниже порога чувствительности анализа.

Такой тест может быть также и ложноположительным или ложноотрицательным, из-за загрязнения биоматериала или наличия в пробах специфических веществ, реагирующих с химическими компонентами, необходимыми для проведения анализа.

Следует подчеркнуть, что в острых фазах гепатита С качественное исследование по методу ПЦР может выявлять его РНК уже после 1-2 недель от момента инфицирования организма. Это значит, что выявлять болезнь можно задолго до проявления ее внешних симптомов или появления в организме антител к гепатиту.

Забор крови (из вены) желательно выполнять натощак.

Количественный анализ ПЦР

При помощи данного анализа определяют уровень концентрации вируса гепатита у больного (вирусную нагрузку). Такой тест нужно сдать, чтобы оценить количество РНК вируса в единице определенного объема.

Расшифровка анализов на гепатит с, проведенная по такой методике, может иметь следующие результаты:

  • Количественный показатель (в цифрах)
  • Концентрация вируса (количество) приводится в цифровом выражении. Для этого используются разные показатели единиц измерения: либо МЕ/мл (международная единица на миллилитр), либо копий/мл (количество копий РНК вируса в миллилитре). В среднем 1 МЕ/мл соответствует 4 копиям/мл, поскольку разные тест системы имеют различные коэффициенты перевода таких единиц измерения.

    Низким уровнем вирусной нагрузки считают значения данного анализа меньше 400000 МЕ/мл, а высоким является показатель 8000000 МЕ/мл.

    работники в лаборатории

    Такая количественная оценка позволяет определить уровень инфекционности заболевания («заразность») больного. Чем больше этот показатель анализа, тем выше вероятность риска передачи возбудителя другим людям (при половом контакте или вертикальным путем).

  • Результат «Ниже диапазона измерений»
  • Этот вердикт означает, что количественный метод не смог обнаружить РНК гепатита, однако сам вирус присутствует в организме, только в очень малой концентрации. Это было подтверждено проведением дополнительного качественного анализа ПЦР, и он своим положительным результатом свидетельствует о факте присутствия гепатита.

  • Результат «Не обнаружено»
  • Данная положительная расшифровка анализа говорит о том, что сам количественный тест в пробе крови не смог обнаружить специфических РНК частиц вируса гепатита С.

Количественный анализ ПЦР, проводимый на разных сроках противовирусной терапии (1-я, 4-я, 12-я и 24-я недели) позволяет судить об эффективности лечения и делать необходимые поправки.

Специфика анализа

Данный тест нужно сдать, чтобы определить различные генотипы гепатита С. В настоящее время известно 11 генотипов данного возбудителя и множество субтипов. В нашей стране распространены генотипы гепатита С 1-го, 2-го и 3-го видов. В лабораториях могут выявлять разнообразные субтипы этих видов: 1а, 1в, 2а, 2в, либо 3, 4, 5, 6 генотипы с различными модификациями субтипов. Для всех этих гепатитов специфичность определения составляет 100%.

Уточнение модификации генотипа дает возможность подбирать соответствующее лечение. Наличие у больного тех или иных видов генотипа не свидетельствует от том, что заболевание легче или сложнее, они являются лишь разновидностями вируса гепатита, и не больше.

В тех случаях, когда в лаборатории не могут выделить генотип вируса, может быть выдан результат: «Не типируется. Были исследованы генотипы: такие-то» (к примеру, 1а, 2в, 3ав). Эта расшифровка говорит о том, что в данной лаборатории не было соответствующих реагентов, которые смогли бы детерминировать генотип вируса гепатита. При исследовании проводилась проверка на вирусы, данные в перечне, но соответствия их с образцами РНК не были выявлены.

Чтобы поставить окончательный диагноз, недостаточного лишь одного вида анализа. Каждый из тестов может дать ложноположительный результат. Для точного определения типа гепатита и степени поражения этой инфекцией организма проводят комплексное исследование. При этом делается биопсия печени и тестирование ее ферментов: АлАТ, АсАТ, а также ЩФ и ЛДГ. Может выполняться также тест на билирубин и анализ протромбинового индекса.

Лишь комплекс таких тестов и лабораторных исследований, с общим анализом состояния больного поможет определить наличие гепатита в организме, его форму, а также степень выраженности. На их основании доктор может определить дальнейшее лечение и сделать возможный прогноз для больного.

veneradoc.ru

Что это такое?

Такое исследование проводят чтобы понять, как много молекул вируса находится в организмеТакое исследование проводят чтобы понять, как много молекул вируса находится в организме

Количественный анализ — это исследование крови на присутствие гепатита. Он показывает как клеток в организме инфицировано вирусом, развивается ли заболевание или нет.

То есть он показывает концентрацию или нагрузку РНК гепатита С в организме человека в единицах на миллилитр или 1 кубический сантиметр крови.

В отличие от него, качественный анализ помогает определить только присутствие РНК вируса.

В каких случаях делают?

Исследование делается параллельно с качественным анализом после того, как проверка крови на наличие антител к гепатиту (ИФА) показала положительный результат. Делают его несколько раз:

  • при первичной диагностике гепатита С до принятия решения о выборе курса лечения;
  • во время лечения заболевания (обычно на 1, 4, 12 и 24 неделе) для определения клинической картины результатов терапии;
  • после лечения для определения рецидива.

Важность

Количественный анализ является одним из основных видов исследования, на которые врач полагается при выборе методов лечения гепатита. Он служит для того чтобы:

  1. Понять как сильно организм заражен вирусом, количественное присутствие антигенов в теле.
  2. Эффективности выбранной терапии.
  3. Подобрать метод лечения и составить его прогноз.

При этом данный анализ не позволяет судить о степени поражения печени или тяжести течения заболевания для организма. Для этого используют другие исследование, к примеру биохимический анализ крови, эластометрия, биопсия и другие.

Способ и сроки выполнения

Забор крови из вены обычно происходит с утра. Благодаря использованию  полимеразной цепной реакции (ПЦР) такое исследование можно назвать одним из самых точных в области определения вируса.

Без использования научной терминологии можно описать процесс так: взятый биоматериал смешивают с определёнными ферментами, которые позволяют скопировать ферменты РНК ил ДНК вируса. Так делают до тех пор, пока не становится достаточно этих молекул для выявления возбудителя.

Срок выдачи результатов отличается в зависимости от медицинского учреждения и его загруженности. Итоги можно подвести спустя 4-5 часов после начало исследования. Поэтому результат могут выдавать уже на следующий день после забора крови.

Чем современней лаборатория, оборудование и реагенты, тем точнее и быстрее можно получить результатыЧем современней лаборатория, оборудование и реагенты, тем точнее и быстрее можно получить результаты

Подготовка к сдаче крови

Сдача биоматериала на проведение анализа происходит из вены. Особых рекомендаций по подготовке нет, поэтому актуальны стандартные правила, которые нужно соблюдать перед сдачей крови на исследование:

  1. Делать это лучше утром натощак (последний прием пищи должен быть не ранее 8-12 часов до сдачи).
  2. Если забор крови происходит не утром, то на завтрак нельзя употреблять жирную пищу (интервал в 8-12 часов также должен соблюдаться).
  3. Отказаться от алкоголя, жирной и жаренной еды за 1-2 дня до исследования.
  4. Не приходить на анализ на следующий день после праздничного застолья.
  5. Курение запрещено как минимум за час до сдачи биоматериала.
  6. Перед забором крови стоит посидеть 10-15 минут в спокойствии, чтобы расслабить тело, исключить влияние на результаты напряжения, как физического, так и психологического.
  7. Если принимаете какие-либо лекарственные средства или им подобные препараты, то анализ можно сдавать спустя 10-14 дней после последнего их приема. (об этом факте необходимо сообщить врачу, возможно он установит иное условие).
  8. Биоматериал не сдается сразу после выполнения ректального исследования, рентгенографии, физиотерапевтических процедур.
  9. Первоначальный и повторный анализы лучше сдавать в одной и той же лаборатории (медицинском учреждении), так они разные заведения могут использовать различные реагенты, оборудование, единицы измерения и точность.

Расшифровка результатов

В зависимости от уровня концентрации вируса в организме делают различные выводы касательно терапии заболеванияВ зависимости от уровня концентрации вируса в организме делают различные выводы касательно терапии заболевания

Далее, определяют эффективность лечения. Если при повторном анализа нагрузка вируса является меньшей, чем 8*105 МЕ/мл, то можно утверждать, что терапия идёт в правильном направлении и в борьбе с заболеванием есть успех.

Говорить о раннем вирусологическом ответе можно при условии снижения количественного присутствия РНК вируса на третий день лечения. Но вероятность этого находится на уровне 85%.

Если же, показатель более 8*105 МЕ/мл, то доктор должен пересмотреть схему лечения и выбрать более подходящую. Соответственно, чем больше уровень, тем сильнее вирус поразил организм и хуже прогноз.

При этом результаты в разных лабораториях могут указываться в МЕ/мл или в копиях на мл. Коэффициент перевода разные (колеблются примерно от 1 до 5) и зависит от метода, использованного для определения количественного показателя. В основном на практике принято, что 1 МЕ/мл = 4 копиям на мл.

Бывают ли ошибки?

К сожалению, диагностика может быть ошибочной. Но это только в том случае, если медицинское учреждение использует устаревшее оборудование, неподходящие реактивы, тогда некоторая доля неправильных результатов присутствует.

Также могут повлиять такие факторы:

  • присутствие гепарина либо ингибиторов в крови;
  • загрязнение биоматериала в процессе выполнения исследования.

При правильной подготовке к анализу в современных лечебных центрах такая вероятность близка к нулю.

К кому обращаться и какая стоимость

Если у вас есть подозрения на гепатит, стоит обратиться к вирусологу, инфекционисту или гепатологу. В случае надобности они отправят вас к другим врачам.

Цена на такие исследования может быть разной. Кроме того, что она зависит от наценок самих диагностических центров, так и от сложности работы, оборудования и т. д.

В современный лабораториях ориентироваться можно на 2900-3000 рублей (1350-1400 грн) без стоимости взятия крови из вены. Есть и клиники, которые предлагают выполнить анализ от 300 рублей (около 140 грн).

Примерная форма результатов анализа выглядит таким образомПримерная форма результатов анализа выглядит таким образом

Заключение

Для подведения итогов статьи выделим главные моменты:

  1. Количественным анализом на гепатит С называют исследование крови на присутствие клеток вируса с указанием его нагрузки.
  2. Показатель измеряется в единицах на миллилитр или 1 кубический сантиметр крови.
  3. Анализ делают как при первичной диагностике, так и последующей для определения эффективности выбранной терапии или выявления рецидива.
  4. Не позволяет говорить про уровень здоровья печени, нарушенного в результате заражения вирусом гепатита С. Для этого могут быть выполнены сопутствующие исследования: биохимический анализ крови, эластометрия, биопсия и др.
  5. В основном сдача крови происходит утром, биоматериал берут из вены.
  6. Не рекомендуется курить, употреблять алкоголь, жирную или жареную пищу перед сдачей анализа. При этом приветствуется соблюдение правил подготовки к исследованию, указанных в статье.
  7. Если анализ показал, что в плазме крови нагрузка вируса более 600 МЕ/мл, то произошло заражение и развитие гепатита С в организме.
  8. В том случае, когда повторные анализы показывают нагрузку более 8*105 МЕ/мл, врач должен пересмотреть схему и способы лечения. Это говорит об отсутствии эффективности выбранной терапии.
  9. Вероятность ошибки при количественном исследовании крайне мала. Однако, возможно загрязнение биоматериала, присутствие в нём ингибиторов или гепарина, что сделает анализ ложным.
  10. Нижний порог стоимости процедуры — 300 рублей (без цены забора крови) и растёт в зависимости от используемых реагентов, оборудования в лаборатории и других факторов.

pe4en.net

РНК-анализ HCV RNA методом ПЦР

РНК (рибонуклеиновая кислота) — вид макромолекулы, одна из составляющих живой клетки. РНК отвечает за кодировку генетической информации. Вирус гепатита С содержит молекулу РНК и имеет обыкновение мутировать. Известны 6 его подтипов, а также много субтипов.

Болезнь в своей хронической стадии приводит к фиброзу печени — разрастаются соединительные ткани, структура органа постепенно нарушается. Фиброз поддается своевременному лечению, так как печень не подверглась еще разрушительным процессам. В отличие от цирроза, тяжелого необратимого заболевания печени, в который может перерасти фиброз без принятия необходимых мер вовремя.Количественный анализ: как расшифровать анализы на гепатит С?

Человеку с подозрением на наличие у него вируса гепатита, определяют антитела к нему. Если их нет — заболевание исключается, при их наличии прибегают к методу ПЦР (полимеразной цепной реакции). В молекулярной биологии он является экспериментальным, но занимает ведущее место среди методик диагностирования инфекционных болезней. С помощью него можно значительно увеличить концентрацию фрагментов молекул в пробе. Через 10 дней после инфицирования РНК уже возможно определить в крови.

Этот метод является единственным, позволяющим выявить заболевание на ранних стадиях. Другими способами (напр. биохимическим исследованием крови) это сделать невозможно, так как печень еще не поражена.

Анализы при гепатите С с расшифровкой (ПЦР) являются надежным показателем наличия вируса в крови человека.

Открыл метод в 1993 году биохимик Кэрри Муллис, за что получил Нобелевскую премию. ПЦР стал прорывом в медицине и науке, так как позволил быстро и точно определять инфекции в крови и других биологических материалах человека. Иными словами, метод ускорил развитие диагностики инфекционных заболеваний.

РНК-анализ HCV RNA методом ПЦР является эффективным по следующим причинам:

  • имеет хорошую чувствительность — определяется даже малое количество вируса в крови;
  • определяется сам вирус, а не побочные продукты, создаваемые им;
  • определяется вид возбудителя.

Отличия количественного анализ HCV RNA от качественного

Метод ПЦР включает два основных способа исследования биологического материала на поиск вируса гепатита С:Количественный анализ: как расшифровать анализы на гепатит С?

Эти исследования имеют различные задачи.

Качественный анализ на гепатит с расшифровкой подтверждает наличие вируса после того как в крови уже найдены антитела к этому заболеванию. Если исследование дало положительный результат, значит, болезнь обнаружена. Иными словами, человек инфицирован. Если получен отрицательный результат, это означает, что человек не инфицирован, либо в наличии слишком маленькая концентрация вируса. Эта концентрация не обнаруживается таким способом.

Помимо этого клиническая картина заболевания строится на основании маркеров гепатита С и расшифровки анализа. Основные маркеры — иммуноглобулины (антитела) M и G. Наличие их в крови пациента указывает на нехарактерный процесс для здорового организма. На основании наличия этих антител больному, как правило, устанавливается первичный диагноз.

Количественный анализ назначается при первичном обнаружении антител и при необходимости проведения лечения.

Также количественный анализ на гепатит С назначают при выявлении микст-гепатитов (заражение сразу несколькими вирусами).

Количественный анализ с расшифровкой проводится с целью:

  • прояснения окончательного диагноза;
  • выстраивания прогнозов относительно течения заболевания и его лечения — продление, сокращение лечения либо изменение тактики;
  • мониторинга терапии.

Международный показатель МЕ/мл означает, что исследуется количество РНК в 1 мл крови. Высокий количественный показатель говорит о повышенной вероятности заражения другого человека.

Чтобы результаты были верными, нужно соблюдать установленный режим перед тем как сдавать кровь:

  • прийти в лабораторию натощак, последний раз принять пищу можно за 8 часов до процедуры;
  • за два дня до исследования запрещен алкоголь, жирные и жареные продукты;
  • ультразвуковые исследования, массаж, физиотерапию перед исследованием проводить нельзя;
  • за день запрещен прием лекарств, если прием отдельных препаратов невозможно отменить, об этом сообщается до забора крови;
  • перед процедурой рекомендуется снизить по возможности физические и нервные нагрузки.

Выполнение этих требований будет залогом получения верных результатов количественного анализа на гепатит С.

Расшифровка количественного анализа

Количественный анализ: как расшифровать анализы на гепатит С?После получения показателей количественного анализа необходимо сделать расшифровку результатов анализов на гепатит С. Результаты вычисляются и в единицах МЕ/мл, и в копиях на мл. Для получения результатов, пересчитанных в копии, применяют несколько методик.

  • HCV Monitor (коэффициент пересчета на МЕ — 2,7);
  • LCX HCV RNA (коэффициент пересчета на МЕ — 3,8).

Таблица. Расшифровка количественного анализа HCV RNA методом ПЦР.

Обнаружен, виремия выше диапазона измерений

Такая расшифровка результатов анализов на гепатит С помогает определить степень опасности заболевания в плане возможности его передачи. Чем больше обнаружена концентрация вируса в крови при расшифровке, тем выше вероятность заразить другого человека. Также концентрация влияет на успешность назначаемого лечения.

Норма количественного анализа

Нормальным результатом количественного анализа на гепатит С для здорового человека считается полное отсутствие вируса в крови. На это должен указать качественный анализ, он проводится пациентам, у которых обнаружены антитела к вирусу.

Нормой при расшифровке анализов на гепатит С считается — «вирус не обнаружен».

Если количественный анализ с расшифровкой показал результат меньше 400 тыс. МЕ/мл, можно говорить о минимальной концентрации вируса в крови, но не об отсутствии заболевания. Нагрузку более 800 тыс. МЕ/мл определяют как высокую. Однако среди специалистов нет согласия в определении минимальной и максимальной концентраций. Границей считают 400 тыс. МЕ/мл.

Вероятность ошибочного результата

Количественный анализ: как расшифровать анализы на гепатит С?Получение ошибочного результата возможно. Это может быть объяснено несколькими причинами.

  1. Ошибка работы диагностического центра — лаборатории. Иногда нарушаются правила проведения исследования, неверно подготавливаются образцы.
  2. Исследуемый образец загрязнен.
  3. Определение в крови гепарина — вещества, которое препятствует свертыванию крови.
  4. Определение в крови ингибиторов — веществ, задерживающих физико-химические процессы.
  5. Применение различных способов и реактивов в разных лабораториях.

Лучше проводить исследование в современной, хорошо себя зарекомендовавшей лаборатории. Для получения правильного результата важна чувствительность системы диагностики. Это нужно для пациентов с невысокой вирусной нагрузкой. Желательно, чтобы чувствительность была не ниже 50 МЕ/мл.

Частота проведения количественного анализа

Сдача анализов на гепатит с расшифровкой — надежный современный способ диагностики. Исследования проводятся до лечения, во время и после него, при наличии как острой, так и хронической форм заболевания. Диагностика, проведенная до терапии, определяет его эффективность в дальнейшем.

Традиционно исследование проводят перед назначением противовирусной терапии и через три месяца после лечения.

Во время лечения забор крови делают на 1-й, 4-й, 12-й и 24-й неделях. Уже на 12-й неделе показатель виремии должен значительно снизиться. Если этого не происходит, лечение неэффективно и нужно подыскивать новое. Например, с 1 млн МЕ нагрузка должна уменьшиться до 100 тыс. МЕ. После окончания лечения проводят расшифровку анализа гепатита С для исключения рецидивов.

Заключение

  1. Cтоимость проведения исследования для пациентов при отсутствии страховых случаев колеблется в пределах от 500 до 5 000 руб. Такой разброс цен вызван качеством реактивов.
  2. Набирает популярность метод ТМА (транскрипционная амплификация), известный пока только за пределами России. ТМА обладает хорошей чувствительностью (5–10 МЕ/мл).
  3. Количественный анализ на гепатит с расшифровкой поможет пациенту вовремя предпринять необходимые меры для излечения заболевания либо быть уверенным, что ему ничего не угрожает. А также уберечь окружающих его знакомых и родственников от возможности заражения.
  4. Проведение тестирования на наличие этого опасного вируса и особенно его определение методом ПЦР в большой степени определяет успешность проводимой терапии.
  • Главная
  • Гепатит
  • C

healthyorgans.ru

Стоимость пцр

ПЦР анализ, стоимость которого зависит от применяемых реактивов, и может составлять от 300 руб. до 5000 руб., выполняется от одних суток до недели.

Кроме метода ПЦР для выявления РНК ВГС также используется метод транскрипционной амплификации (ТМА), обладающий лучшей чувствительностью (порядка 5-10 МЕ/мл.), однако этот метод в России пока не распространен.

Как часто нужно делать ПЦР гепатита C? Обычно его проводят сразу после обнаружения антител к гепатиту C и после 4-й, 12-й, 24-й недели противовирусной терапии, а также через 24 недели после завершения ПВТ, а затем — ежегодно, в случае УВО.

Рис. 1. Пример результатов качественного ПЦР гепатита С.

ПЦР гепатита С

Количественный анализ ПЦР (вирусная нагрузка) — это тест на концентрацию вируса (виремию) в  крови. Вирусная нагрузка — это количество единиц генетического материала (вирусной РНК), которая присутствует в определенном объеме крови (обычно это 1 мл, что соответствует 1 кубическому сантиметру). Это количество выражается в цифрах, единицы измерения МЕ/мл (международные единицы на миллилитр). Количество вируса может быть отображено по-разному. Например, 1,5 млн МЕ/мл, что соответствует 1.500.000 МЕ/мл или 1.5* 106 МЕ/мл. В некоторых лабораториях используются другие единицы измерения — копии/мл. Коэффициент пересчета из копий в международные единицы различный для разных тест-систем. Примерно значения можно пересчитать по формуле 1 МЕ/мл = 4 копии/мл, например, 5.5* 105 МЕ/мл = 2.2* 106 копий/мл.

На что же влияет вирусная нагрузка?

Во-первых, на инфекционность. Чем выше концентрация вируса, тем выше риск передать вирус, например, при половых контактах или вертикальным путем. Во-вторых, концентрация вируса влияет на эффективность лечения (если лечение будет проводиться на основе интерферона). Так, низкая вирусная нагрузка является благоприятным фактором при проведении терапии, а очень высокая – неблагоприятным. Также, количественный ПЦР имеет большое значение при проведении интерфероновой терапии для оценки ее успешности и планировании длительности курса. Так, при быстром ответе на лечение и низкой виремии перед терапией, сроки лечения могут быть сокращены. И, наоборот, при медленном снижении концентрации вируса, ПВТ может быть продлена.

Какая нагрузка считается низкой, а какая — высокой?

Высокой принято считать нагрузку свыше 800 *103 или 800.000 ME/мл, что примерно составляет 300*104 или 3.000.000 копий /мл. Нагрузка свыше 1*107 ME/мл считается очень высокой. Однако до сих пор среди специалистов нет общего мнения о значениях, разграничивающих высокую и низкую виремию. Так, в некоторых работах этой границей считается цифра 400.000 ME/мл.

Как часто нужно делать количественный тест?

Обычно его делают перед проведением терапии и после 12-й недели лечения для оценки ее эффективности в случае, если качественным тестом РНК еще определяется.

Результатом количественного теста может быть количественная оценка виремии в формате, описанном выше, а также результаты «ниже диапазона измерений» и «не обнаружено».

Порог чувствительности количественного ПЦР обычно выше, чем качественного. Так, для системы COBAS AMPLICOR он составляет 600 ME/мл. Результат «не обнаружено» может означать, что количественный тест и подтверждающий качественный тест не обнаружил вирусную РНК. Результат «ниже диапазона измерений» означает, что количественный тест не выявил РНК гепатита С, но вирус присутствует в очень малой концентрации (в случае, если при этом был проведен дополнительный подтверждающий качественный тест).

Рис.2 Пример результатов количественного теста.количественный ПЦР

 

www.hv-info.ru

Здравствуйте. Редко встречаются пациенты, столь подкованные в своей болезни. Анализы на вирусный гепатит — обнаружение ПЦР вируса, антигенов вируса, свидетельствуют, вероятнее всего, о наличии у вас хронического вирусного гепатита В, причем вызванный мутантным штаммом вируса. Как известно, синтез антигенов вируса детерминируется определенными генами ДНК вируса. При изменении (мутации) этих генов, просто не синтезируются белки участвующие в синтезе этого антигена (HbeAg), но антитела к антигену вырабатываются. Что касается лечения. Противовирусная терапия вирусного гепатита В очень сложная задача. Она ставит пред собой две цели: полная элиминация (уничтожение) вируса и/или улучшение морфологической структуры печени (профилактика развития цирроза печени). Первую задачу выполнить достаточно сложно – эффективность применения интерферонов не превышает 50%. Причем эффективность лечения зависит от многих факторов – возраста, пола, веса пациента, наличия сопутствующей патологии, вирусной нагрузки, длительности заболевания, изменений со стороны печени. Но, к сожалению, кроме интерферонотерапии, в мире не существует общепризнанных методов лечения вирусных гепатитов, позволяющих полностью избавиться от вируса. Как вы сами, наверное, поняли, принятие решения о назначении противовирусной терапии- большая ответственность не только для пациента, но и для врача. Поэтому это вопрос должен решаться сугубо индивидуально, и я не имею права давать вам какие-либо рекомендации по обследованию и лечению заочно. Единственное, что могу сказать – найдите специалиста, который имеет опыт лечения таких пациентов. И напоследок выскажу свое мнение: если вас ничего не беспокоит, нормальные биохимические анализы, то применение интерферонов, скорее всего, будет неэффективным. Вам необходимо соблюдать диету, находиться под наблюдением инфекциониста и/или гастроэнтеролога и периодически сдавать печеночные пробы. Специализированные центры, которые занимаются лечением только вирусного гепатита В, в Киеве отсутствуют. Но вы можете обратиться за консультацией в НИИ инфекционных болезней (находится по ул. Январского восстания), городской гепатологический центр (на базе больницы №15). Что касается «спонсорских программ», то они существуют в виде исследовательских программ, т.е. пациент получает бесплатное лечение в обмен на согласие участвовать в исследовании. Берегите здоровье!

www.health-ua.org



Источник: pechen5.ru


Добавить комментарий