Анализ вирус гепатита с генотип

Анализ вирус гепатита с генотип

Содержание статьи:

Что такое ПЦР анализ и вирусная нагрузка?

НАШИ ЧИТАТЕЛИ РЕКОМЕНДУЮТ!

Для лечения печени наши читатели успешно используют Leviron Duo. Видя, такую популярность этого средства мы решили предложить его и вашему вниманию.

пцр на гепатит с

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – это лабораторный метод определения ДНК и РНК. Впервые он был опробован почти полвека назад американцем Кэри Муллисом. Этот сверхчувствительный анализ способен определить носителя генома по одной исходной молекуле, содержащейся в крови, слюне или коже.

Метод ПЦР имеет огромные перспективы, находит применение не только в медицине, но и в генной инженерии, и в криминалистике. С его помощью клонируют и создают новые виды ДНК, определяют степень родства. По кусочку эпителия, найденного на месте преступления, устанавливают преступника.

Анализ ПЦР на гепатит – что это и зачем делают?

Почему необходим анализ ПЦР при подозрении на гепатит С, что это такое?

Фото 1

Вирус гепатита С – РНК содержащий вирус, имеет 6 генотипов и до 500 субтипов. Из всех гепатитов этот вирус обладает самой высокой мутационной способностью и преодолевает защитный барьер иммунной системы. Из общего числа заболевших гепатитами, вирус С стал причиной 70% случаев хронической формы и 30% цирроза и рака печени.

Суть способа: часть исследуемого гена с помощью специальных ферментов и условий заставляют размножаться в пробирке. Анализ ПЦР позволяет определить штамм вируса, без которого невозможно провести результативное лечение: каждый генотип по-разному чувствителен к антивирусным препаратам. Применяется два типа ПЦР:

  • качественный;
  • количественный.

Противовирусная терапия нуждается в постоянном контроле, чтобы своевременно скорректировать лечение, для этих целей также используется полимеразная цепная реакция.

Качественный и количественный ПЦР

ПЦР качественный на гепатит С дает ответ: есть ли в крови пациента штамм вируса С и какой именно. Генотипирование необходимо для уточнения диагноза, прогноза заболевания и определения сроков лечения.

Фото 2

По принятой классификации ген обозначается числом, а подтип маленькой латинской буквой.

Расшифровка таблицы генотипов вируса С:

  • Генотип 1а, 1b, 1с
  • Генотип 2а, 2b, 2с, 2 d
  • Генотип 3а, 3b, 3с, 3d, 3e, 3f
  • Генотип 4а, 4b, 4с, 4d, 4e, 4f, 4g, 4 h, 4 i, 4 j
  • Генотип 5 а
  • Генотип 6 а

Самые распространенные генотипы 1,2,3. В России чаще всего встречаются 1а, 1b, 2 и 3 штаммы вируса С.

Генотип вируса 1b труднее других поддается лечению, в 90% переходит в хроническую форму, из которых 30% перерождаются в рак или цирроз печени.

Генотипы 2а и 3а имеют степень хронизации 33-50 %, более отзывчивы на противовирусную терапию.

При подтверждении присутствия вируса проводится ПЦР количественный на гепатит С, с помощью которого рассчитывают количество молекул РНК, находящихся в лабораторном образце больного.

Расшифровка анализа

Качественный ПЦР анализ имеет два ответа:

  • отрицательный;
  • положительный.

ПЦР отрицательный означает, что возбудитель в образцах крови не обнаружен.
Положительный ответ свидетельствует об обратном: обнаружены РНК того или иного генотипа вируса С.

Фото 3

Вероятность достоверности результата равна 95%. Остальные 5% — это ошибка по вине человека. Такая возможность допускается из-за высоких требований к проведению исследования:

  • правил хранения реактивов;
  • соответствующей квалификации медперсонала;
  • чистоты биоматериала.

Сам набор ПЦР имеет 100% диагностическую точность.

Количественный ПЦР РНК гепатита С позволяет определить вирусную нагрузку на организм больного. С его помощью:

  • уточняется стадия заболевания (острая, хроническая);
  • определяется эффективность противовирусного лечения;
  • выясняется необходимость биопсии печени.

Фото 4

В некоторых случаях больной не ощущает никаких признаков болезни, в то время как методом ПЦР установлено инфицирование ВГС. Это означает, что заболевание находится на ранней стадии развития либо в хронической форме. Для уточнения диагноза необходимы дополнительные исследования, для скорейшего начала противовирусного лечения.

Вирусная нагрузка при гепатите С

Вирусная нагрузка показывает активность печеночного вируса, насколько активно происходит его размножение.

Что это?

ПЦР количественный гепатита С измеряется в Международных Единицах на 1 мл или МЕ/мл, что означает, сколько в 1 мл исследуемой крови обнаружено копий рибонуклеиновой кислоты определенного штамма вируса С.

Какая считается высокой, какая низкой?

Анализ на вирусную нагрузку позволяет определить наличие вирусных РНК в концентрации 50 МЕ/мл. Вирусная нагрузка в норме – это когда ПЦР не обнаружено ни одной молекулы РНК ВГС.

Фото 5

Таблица вирусной нагрузки:

  • низкая – концентрация от 600 МЕ/мл 3*104 МЕ/мл;
  • средняя – концентрация от 3*104 МЕ/мл до 8*105МЕмл;
  • высокая – уровень более 8*105 МЕ/мл.

Низкая вирусная нагрузка – это сигнал, что терапевтическое лечение подобрано правильно, и прогноз на излечение от гепатита С – благоприятный.

Высокая концентрация вирусных клеток свидетельствует, что болезнь находится в острой фазе. Кровь пациента является опасным источником инфекции.

Вирусная нагрузка, показатели которой находятся на среднем уровне, характеризует либо хроническую стадию ГВС, либо может иметь два тренда развития: к ее повышению или понижению.

По ее окончании – через 6 месяцев делается контрольная ПЦР.

Стоимость ПЦР диагностики

Поводом для беспокойства должны стать следующие симптомы:

  • общая слабость;
  • изменение цвета кожи, глазных склер, выделений;
  • тошнота;
  • снижение аппетита;
  • боли в мышцах и суставах;
  • тяжесть в правом подреберье;
  • повышенный уровень в крови АСТ и АЛТ.

Фото 6

При контакте с инфицированными больными, в предоперационный период, при гемодиализе также рекомендовано обследование.

Государственные клиники делают анализ крови на ПЦР бесплатно, если имеется направление от инфекциониста или гепатолога.

Платные услуги по ПЦР диагностике оказывают во всех крупных российских городах. Стоимость зависит от типа теста, имеющегося оборудования, сроков проведения и других факторов.

Качественный ПЦР анализ в Москве и С-Петербурге обойдется от 600 до 900 руб. В регионах – от 300 до 800 руб.

Определение вирусной нагрузки гепатита С будет стоить 17000-22000 руб. Для прочих видов инфекции цена количественного исследования: 1200-10000 руб.

Достоинства и недостатки метода ПЦР

В чем преимущества метода полимеразной цепной реакции перед другими диагностическими способами?

Фото 7

  1. Широкий спектр применения. С помощью ПЦР, используя типовое оборудование, можно определить любой вирус.
  2. Точность определения возбудителя. Применяя различные комбинации ферментов и технику проведения анализа, достигается 100% спецификация исследования для обозначенной инфекции.
  3. Высокая чувствительность. Методика позволяет выявить присутствие в крови одной молекулы вируса.
  4. Оперативность. Качественный анализ бывает готов через несколько часов, количественный – через двое суток.
  5. Диагностика вируса в инкубационном периоде. При ПЦР возбудитель определяется не по наличию антител, когда уже имеется иммунная реакция организма, а до начала патологического процесса, что облегчает лечение.

Недостатки ПЦР являются следствием ее достоинств:

  • для чистоты анализа требуется высочайшая степень чистоты, в том числе воздуха в лаборатории, чтобы «чужие» ДНК не попали в исследуемый образец;
  • высокие требования к персоналу, осуществляющему забор и анализ биоматериала.
Станьте первым комментатором!

Анализы на гепатиты

Анализ на гепатит А,В,С и остальных типов помогают уточнить, есть заболевание или нет, определить стадию, а затем прогнозировать ее течение.

Зачастую человек обращается к врачу с недомоганиями, напоминающими симптомы простуды: слабость, повышение температуры, тошнота. Обследование начинается с общего и биохимического анализов крови. В случае подтверждения заболевания гепатитом больной направляется на анализ ПЦР (полимерная цепная реакция).

Лабораторные методы позволяют определить, каким вирусом заражен человек, насколько он заразен. Степень опасности распространения болезни зависит от типа гепатита, так как заражение происходит различными путями:

  • Передается через общие предметы гигиены, белье, общую посуду (гепатиты A, B), при бытовом общении;
  • Передается через кровь при лечении зубов, переливании крови (гепатиты C,D,E).

Особенность различных анализов при гепатитах

При обследовании необходимо сдать несколько важных анализов на гепатит. Лабораторная диагностика включает в себя:

НАШИ ЧИТАТЕЛИ РЕКОМЕНДУЮТ!

Для лечения печени наши читатели успешно используют Leviron Duo. Видя, такую популярность этого средства мы решили предложить его и вашему вниманию.

  • Общий анализ крови;
  • Биохимический анализ;
  • ПЦР (полимерная цепная реакция).

Общий анализ крови

Анализ на гепатит А,В,С  показывает содержание гемоглобина (при гепатитах оно растет), СОЭ — скорость оседания эритроцитов (повышена при заболеваниях печени). Он также позволяет определить, сколько эритроцитов в крови (для определения возможности образования тромбов), лейкоцитов (наличие воспалительных процессов в организме). Определяется свертываемость крови, то есть способность печени вырабатывать белок. При наличии гепатитов эта функция понижена, свертываемость ниже нормы.

Биохимический анализ

Посредством биохимического анализа определяется, сколько в крови билирубина, холестерина, мочевой кислоты, белка, жиров, ферментов и других веществ. При отклонении каких-то показателей от нормы можно судить о степени поражения печени, наличии диффузных изменений, характерных для различных болезней. Избыток жиров может свидетельствовать о гепатозе, наличии опухолей. Содержание билирубина подтверждает наличие холестаза — нарушения циркуляции желчи из-за увеличения печени, наличия камней в желчных протоках.

Анализ на гепатит А,В,С  и других типов позволяет определить тип возбудителя по содержанию антител и гормонов. Существуют 2 типа иммунологических анализов:

  1. Иммунохроматографический (ИХА);
  2. Иммуноферментный (ИФА).

В первом случае анализ делают с помощью индикаторов, позволяющих визуально определить процент антител и гормонов. Преимущества этого метода состоят в его простоте, отсутствия необходимости применения дорогостоящего оборудования, Быстрый тест проводится с помощью полосок и контрольных кассет, позволяющих предварительно оценить состояние организма. Такая диагностика обычно проводится при слабовыраженных симптомах. Метод может дать ложноположительные или ложноотрицательные результаты.

Более точной и надежной является ИФА диагностика (определение маркеров на гепатиты). Правда, этот метод нуждается в специальном дорогом оборудовании и особых реактивах. Диагностика занимает много времени и стоит дорого, но ее эффективность и точность результатов оправдывают расходы времени и средств. По составу крови можно узнать, произошли ли диффузные изменения печеночной ткани, насколько велико поражение. Основан этот метод на том, что при попадании в организм вируса с определенным генотипом иммунная система отвечает выработкой белков определенного вида, соответствующего именно этому вирусу. По количественному содержанию антител и антигенов можно с большой точностью определить, каким гепатитом болен человек, насколько благоприятным будет прогноз. Присутствие антител к вирусам (HAV, HBV, HCV, HDV ) подтверждает заболевание человека. Если обнаруживаются антитела IgM класса, то можно сделать вывод о том, болен ли человек активной формой гепатита или является только вирусоносителем.

Метод ПЦР

С помощью этого метода можно диагностировать присутствие даже минимального количества бактерий и вирусов в организме по генотипу вируса. Он также делится на виды:

  1. Качественный, проводится для обнаружения вируса гепатита в организме;
  2. Количественный, дает полную картину развития болезни на данном этапе. Определяется так называемая вирусная нагрузка, то есть количество вирусов. Низкая вирусная нагрузка дает больше шансов вылечиться от гепатита C. По полученным результатам врач назначает соответствующее лечение.

Дополнительные анализы

При обнаружении у больного цирроза печени делается анализ на маркеры онкологических заболеваний.

Такие вирусные инфекции, как сифилис и СПИД также могут быть причиной поражения печени. Поэтому при обследовании делается анализ на сифилис  (рв-реакция Вассермана, позволяющая определить содержание антител к вирусам сифилиса), а также проверка на вич-инфекцию.

Проводится исследование мочи на содержание билирубина и лейкоцитов. Темный цвет мочи является симптомом гепатита. Для проведения биохимического анализа мочи ее надо сдавать, собирая порции в течение суток.

Для диагностики хронических гепатитов часто требуется исследование методом биопсии, проведение анализов печеночной ткани для точного определения характера патологии.

При необходимости хирургической операции обязательно проверяется свертываемость крови (анализ на протромбин), а также проверяется кровь на сифилис (rw-реакция) и СПИД.

Подготовка к сдаче анализов на гепатиты

При неправильной подготовке к сдаче анализов результаты могут вызвать сомнения, потребуется делать анализ повторно. Врач на основании ложных результатов может назначить прием препаратов, которые не принесут пользы.

Правила проведения анализов следующие:

  • За 8-12 часов до сдачи анализа человек должен перестать принимать пищу, чтобы желудок был пустой. Попадание сахара и других компонентов даже в микроскопических количествах может исказить результаты;
  • За день до процедуры надо полностью отказаться от жирной, соленой и острой пищи, алкоголя. За несколько дней необходимо прекратить курение;
  • Как минимум за 2 недели до сдачи анализа надо отказаться от приема любых медикаментов;
  • Перед сдачей анализов надо ограничить физическую нагрузку;
  • Желтые фрукты и овощи содержат каротин, поэтому от них тоже нужно отказаться;
  • За несколько дней надо отменить любые процедуры физиотерапии, а также нельзя делать рентген или УЗИ накануне;
  • Перед проведением анализов надо сообщить о сопутствующих заболеваниях, аллергии на определенные медицинские препараты.
  • Женщины должны выбрать для анализа время так, чтобы на него не повлияли изменения в крови во время менструации.

На результаты могут повлиять стрессы и волнение. Перед анализом на гепатиты надо хорошо выспаться. Анализы сдаются натощак. В ходе лечения врач с помощью анализов контролирует действие препаратов и состояние печени.

Генотипы вируса гепатита C

Генотипы вируса гепатита С представляют собой штаммы – различные варианты возбудителей болезни. Классификация основных видов включает в себя шесть групп, которые для удобства принято обозначать цифрами. Однако, у каждого определенного вида существует свой подвид. Таким образом, общее количество генотипов увеличивается до одиннадцати. В свою очередь, некоторые подвиды разделяются на квази-виды.

Чтобы лечение было эффективным, очень важно правильно установить к какому из имеющихся видов относится вирус гепатита.

Кстати, стоит пояснить для обычного человека, что определение генотипа вируса на медицинском языке звучит как генотипирование. Человек, в принципе, может быть инфицирован вирусом, содержащим только один определенный генотип, но как было уже указано выше, каждый подвид делится на несколько близких по природе вирусов, которые называются квази-видами.

Многие из них способны мутировать (видоизменяться), что существенно затрудняет выбранную тактику лечения. Отметим, что сложность лечения некоторых заболеваний, в частности, желтухи в хронической форме, обусловлена именно эти фактором.

Общая информация о вирусе

Вирус гепатита с

Печень в организме человека выполняет различные задачи. Этот орган можно назвать своего рода рекордсменом по общему количеству выполнения важных функций. Вирусные гепатиты способны вызывать различные изменения всех показателей, определяемых лабораторным путем. Правда, некоторые из изменений не специфичны – могут возникать и при других инфекциях.

Но существуют и такие признаки, которые типичны только для вирусного гепатита. В основном эти изменения затрагивают клетки печени – разрушают их. Это, в свою очередь, ведет к выбросу в кровь большого количества ферментов, которые находятся в гепатоцитах (печеночные клетки называют гепатоцитами).

Вирус гепатита СВирус гепатита С

Рассмотреть, а тем более сделать изображение этого вируса, невозможно из-за того, что его содержание в крови инфицированного человека ничтожно мало. В окружающей среде флавивирусы способны прожить очень короткий промежуток времени, они весьма неустойчивы. Инкубационный период гепатита С длится от трех недель до 120 дней.

Вирус может объединяться с другими вирусами, при этом он способен мутировать, что не лучшим образом сказывается на самочувствии пациента и затрудняет лечение. Нужно отметить, что гепатит может привести к серьезным заболеваниям – образованию недоброкачественной опухоли и циррозу.

Способы передачи вируса

Генотипы такого заболевания, как гепатит С зависят от двух основных факторов — образ жизни человека и место проживания согласно географического расположения. Отмечено, что по всему миру заражение людей происходит отдельным видом вируса, свойственным и преобладающим на данной конкретной территории.

Для того, чтобы разобраться в разнообразии генотипов следует просмотреть описание наиболее распространенных.

Пояснение: цифра — это генотип, а буквенный индекс — это подвид вируса:

Гепатит СГепатит С

  • 1a, 1b, 1c;
  • 2a, 2b, 2c, 2d;
  • 3a, 3b, 3c, 3d, 3e, 3f;
  • 4a, 4b, 4c, 4d, 4e, 4f, 4g, 4h, 4i, 4j;
  • 5a.

Самым распространенным в мире принято считать генотип 1 — на его долю выпадает около 50% от общего числа вирусов. За ним следует генотип 3 — в количественном отношении его показатель более 30%.

Специалисты по всему миру выполняют генотипирование и на основании этих исследований констатируют, что, к примеру, в нашей стране, а также на соседних территориях — Украина, Республика Беларусь распространены в большей степени вирусы генотипа 1, 2, 3.

Если рассматривать подвиды, то в странах бывшего союза преобладает генотип 1b. Медики отмечают, что такой подтип трудно поддается лечению, основанному на приеме препаратов, содержащих интерферон. Только после того, как фармацевтические компании предоставили  лекарство нового поколения, а медики поменяли схему лечения  (теперь интерферон не применяют) эффективность терапии заметно улучшилась.

У пятой части населения выявляют генотип 3а, и поэтому далее будут рассмотрены ситуации, когда может произойти заражение подобным вирусом:

Переливание кровиПереливание крови

  • в группе повышенного риска находятся люди, употребляющие наркотики (способ передачи вируса – нестерильная игла);
  • при половом акте инфекция также может попасть в организм здорового человека;
  • вирус передается человеку через кровь, а значит, при переливании крови может произойти инфицирование;
  • стоматологический кабинет или другие больничные учреждения, где ненадлежащим образом производят дезинфекцию медицинских инструментов — это наиболее опасные места, с точки зрения передачи инфекции.
  • при посещении маникюрного салона — нестерильные инструменты;
  • татуировка и прокалывание ушей или пирсинг может привести к заражению.

В период вынашивания ребенка также может произойти инфицирование плода от зараженной матери.

Такое заболевание протекает бессимптомно длительное время. И только когда болезнь перейдет в запущенную стадию, больной может заметить характерные признаки — тошноту, слабость, нестабильный стул, потерю массы тела, отсутствие аппетита, желтоватое окрашивание кожи и слизистых оболочек. В этом и заключается коварство этой болезни, и, наверное, по этой причине гепатит С называют «убийцей с мягкими лапами».

Заболевание в большинстве случаев переходит в хроническую форму, а у третьей части от общего количества инфицированных вирус может стать причиной цирроза печени.

Правильно определить генотип вируса для медиков является первоочередной задачей перед тем, как назначить пациенту лечение. Поэтому в клиниках проводят генотипирование, а затем на основании полученных данных принимают решение об эффективной методике лечения пациента.

Методы диагностики

ПЦР-диагностикаПЦР-диагностика

В нашей стране применяют экспериментальную технологию по выявлению вирусов, которая называется ПЦР-диагностика. Данный вид анализа способен в значительной мере увеличить концентрацию ферментов ДНК или РНК вируса в отобранных образцах. Такие действия позволяют достоверно распознать, а также  выявить количественный показатель, содержащихся в пробирках вирусов.

Современные способы диагностирования позволяют в 97% случаев выявить инфицированных людей на ранних этапах развития болезни.

Для того, чтобы подтвердить или опровергнуть наличие инфекции в крови человека проводят качественный анализ ПЦР. Пробы для анализа берут у людей, в крови которых были выявлены в результате лабораторных исследований антитела к гепатиту. По результатам анализов медицинские работники могут выдать только два результата — «обнаружено» и «не обнаружено».

Если пациенту был выдан результат с формулировкой «обнаружено», то означает это лишь одно, что в крови человека выявлен вирус, а значит, заражение произошло. Соответственно другая формулировка — «не обнаружено» свидетельствует о том, что в сданном биологическом материале не обнаружены фрагменты РНК, а это может означать, что пациент здоров либо в отобранном образце концентрация на столько мала, что не представляется возможным сделать качественный анализ.

Диагностика гепатитаДиагностика гепатита

В острой стадии гепатита С с помощью метода ПЦР-диагностики можно определить РНК спустя 10 дней с момента инфицирования. В этом случае, заболевание будет определено на ранних стадиях, а значит, существует большая доля вероятности, что человека вылечат.

Выявление у пациента тех или иных видов возбудителя гепатита не может стать причиной постановки диагноза с точки зрения его сложности и стадии заболевания. Анализ лишь показывает, какой из вирусов был обнаружен в крови.

Пациент должен пройти комплексное лабораторное обследование. Только в этом случае доктор сможет, оценив всю ситуацию целиком, поставить диагноз больному и соответственно определиться с выбором лечения, а также прогнозировать дальнейшее развитие клинической картины заболевания.

Source: zheltuha.lechenie-pechen.ru

Читайте также



Источник: hepc.nextpharma.ru


Добавить комментарий