Метод определения активности алт

Метод определения активности алт

Биохимический анализ крови позволяет получить обширное и объективное представление о функционировании того или иного органа и всего организма в целом. Биохимический анализ крови помогает установить, все ли органы работают так, как положено, и нет ли каких-нибудь системных нарушений [Биохимические методы … , 2002].

Работа выполнялась на базе Краснодарской городской клинической больниц № 3. Исследование проводилось с 04.11. 13 по 30.10.14. Обследовалось 50 человек с заболеваниями печени неинфекционной этиологии. Возраст всех больных от 40 до 60 лет, преимущественно мужчины — 80 процентов.

Анализатор ADVIA 1650 — суперпроизводительный автоматический биохимический анализатор выборочного действия (типа Random Access). Имеет встроенную систему контроля качества исследований, возможность проведения срочных анализов, автоматическое разведение образцов. Анализатор имеет высокую производительность данного класса приборов — 1200 тестов в час для фотометрических методов и 1650 тестов в час с ионселективными электродами. Исследуемый материал — сыворотка, плазма, моча. Анализатор выполняет спектрофотометрические, турбодиметрические и потенциометрические методы.

Материал исследования

Материалом исследования служила гепаринизированная сыворотка крови больных с неинфекционными заболеваниями печени для сравнения с референтными значениями.

Кровь, взятая у 20 больных с диагнозом токсический цирроз, 15 больных с первичным билиарным циррозом и 15 больных с лекарственным гепатитом в возрасте от 40 о 60 лет составила три экспериментальные группы. Контрольная группа состоит из 20 человек практически здоровых (распределение соотношения пациентов указано в таблице 1).

Таблица 1 — Распределение больных с заболеваниями печени неинфекционной этиологии

Токсический цирроз — 20

1 экспериментальная группа

Первичный билиарный цирроз (субкомпенсированный) 2 экспериментальная группа

Хронический лекарственный гепатит

3 экспериментальная группа

Контрольная группа — практически здоровые

20

15

15

20

Для получения более информативных данных, забор крови для исследования проводился натощак. Как можно скорее сыворотка отделялась от сгустка крови.

Забор крови проводился в вакуумные контейнеры с раствором гепарина. Перед работой на анализаторе кровь центрифугировалась при 1500 оборотов в минуту в течение трех минут. Определение биохимических показателей проводилось и ручными, и автоматическими методами.

Методы исследования

Определение активности общего белка

Принцип метода: Белки сыворотки (плазма) крови, реагируя в щелочной среде с сернокислой медью, образуют соединения, окрашенные в фиолетовый цвет.

Эта специфическая биуретовая реакция, характерная для пептидов и белков, применима для фотометрического определения [Ивашкин, Ющук, 2012]. В сыворотке здоровых людей содержится 65 — 85 грамм/литр общего белка.

Определение активности аспартатаминотрансферазы

Принцип метода: аспартатаминотрансфераза катализирует реакцию между L-аспартатом и 2-оксоглутаратом, в результате которой они превращаются в L-глутамат и оксалацетат. Определение основано на измерении оптической плотности гидразонов 2-оксоглутаровой и пировиноградной кислот в щелочной среде. Гидразон пировиноградной кислоты, возникающий при самопроизвольном декарбоксилировании оксалацетата, обладает более высокой оптической плотностью. Референтные значения уровня аспартатаминотрансфераза в сыворотке крови — 7- 35 Ед/л [Зайчик, Чурилов, 2000].

Определение активности аланинаминотрансферазы

Принцип метода: аланинаминотрансфераза катализирует реакцию между L-аланином и 2-оксоглутаратом, в результате которой они превращаются в L-глутамат и соль пировиноградной кислоты. Определение основано на измерении оптической плотности гидразонов 2-оксоглутаровой и пировиноградной кислот в щелочной среде. Гидразон пировиноградной кислоты обладает более высокой оптической плотностью. Референтные показатели уровня аланинаминотрансфераза в сыворотке крови — 7 — 45 [Абдулаев, 2005].

Определение активности гамма-глютамилтранспептидазы

Принцип метода: гамма — глутамилтрансфераза катализирует перенос гамма — глутамила с глутатиона на пептид или аминокислоту. Точнее ГГТП переносит глутамильный остаток с гамма — L — плюс — глутамил — четыре — нитроанилида на дипептидный акцептор. Дипептидный акцептор — это глицилглицин, одновременно выполняющий функцию буфера. Концентрацию освобожденного четыре — нитроанилина измеряют фотометрически, и после остановки ферментативной реакции — подкислением [Меньшиков, 2009].

Референтные значения ГГТП для мужчин — до 55 Ед/л, для женщин — до 38 Ед/л.

Определение активности билирубина

Принцип метода: под воздействием соляной кислоты разрывается тетрапирроловая связь билирубина, в результате чего образуются два дипиррола, которые диазотируются диазобензосульфоновой кислотой с образованием розово-фиолетового азобилирубина [Камышников, 2011].

Связанный билирубин реагирует быстро, несвязанный билирубин реагирует после добавления кофеинового реактива.

Содержание общего билирубина в сыворотке в норме 6,8 — 20,5 мкмоль/л, а норма прямого билирубина крови — до 4,3 мкмоль/л.

Повышение содержания билирубина. Возрастание уровня билирубина в сыворотке крови до уровня выше 20,5 мкмоль/л называется гипербилирубинемией [Карпищенко, 2001].

Метод ультразвукового исследования

Обследовано 50 пациентов с заболеваниями печени неинфекционной этиологии. УЗИ проводили на современном ультразвуковом приборе Hawk 2102 XL с использованием линейного датчика с диапазоном частот 6-12 Мгц.

Статистическая обработка результатов

Для получения правомерного заключения по материалам исследований была проведена статистическая обработка результатов. Математическая обработка данных проводилась с помощью методов вариационной статистики. Определялась средняя арифметическая величина (X) показателей в каждой группе, равная сумме вариантов, деленной на число наблюдений (+m) стандартная ошибка проводилась программой Microsoft office Excel 2007.



Источник: studbooks.net


Добавить комментарий