Показатели свободного билирубина и связанного

Показатели свободного билирубина и связанного

⇐ ПредыдущаяСтр 5 из 7Следующая ⇒

Задание 1.Определить содержание общего, связанного и свободного билирубина в сыворотке крови методом Иендрашика, Клеггорна и Гроффа.

Принцип. Метод базируется на способности связанной и диссоциированной формы свободного билирубина образовывать при взаимодействии с диазофенилсульфоновой кислотой азобилирубин розово-фиолетового цвета. Свободный билирубин переводится в растворимое диссоциированное состояние кофеиновым реактивом, благодаря чему в этой пробе определяется общий билирубин. По разности между общим и связанным билирубином находят концентрацию свободного.

Ход работы. В три пробирки вносят, в соответствии с таблицей, необходимые ингредиенты и тщательно перемешивают.

Реактивы Общий билирубин, мл Связанный билирубин, мл Контроль, мл
Сыворотка 0,5 0,5 0,5
Кофеиновый реактив 1,75 1,75
Раствор натрия хлорида 1,75 0,25
Диазореактив 0,25 0,25

При определении общего билирубина пробы оставляют стоять на 20 мин для развития окраски, а связанного — на 5-10 мин (при более продолжительном стоянии в реакцию вступает свободный билирубин). По окончании указанного времени фотометрируют каждую пробу против воды на ФЭК при длине волны 520-560 нм (зеленый светофильтр) в 5 мм кювете. Из полученных экстинкций общего и связанного билирубина отнимают экстикцию контрольной пробы (контроль на мутность сыворотки) и находят содержание общего и связанного билирубина (в мкмоль/л) по калибровочному графику. Свободный билирубин рассчитывают по разности между количеством общего и связанного. Рассчитывают содержание общего билирубина и его фракций в сыворотке крови и делают вывод о причинах возможных отклонений этих показателей.

Клинико-диагностическое значение. В норме содержание общего билирубина в сыворотке крови составляет 4,0-21,0 мкмоль/л; из этого количества 75% приходится на долю свободного билирубина (6,0-15,0 мкмоль/л) и 25% на долю связанного (2,0-5,0 мкмоль/л). К основным факторам, которые вызывают нарушение обмена жёлчных пигментов, принадлежат: повышенный гемолиз эритроцитов, нарушение синтеза билирубинглюкуронидов, нарушение выделения связанного билирубина из гепатоцитов в жёлчные капилляры (деструкция гепатоцитов), нарушение жёлчевыделения вследствие обтурации внепечёночных жёлчевыводящих путей. Паренхиматозная желтуха возникает при гепатитах, циррозах печени и характеризуется резким повышением содержания связанного билирубина в крови. В печени снижается образование билирубинглюкуронида, вследствие этого содержание свободного билирубина в крови также увеличивается. Гемолитическая желтуха возникает при усиленном гемолизе эритроцитов, что приводит к усилению образования свободного билирубина, так как печень не успевает его связывать. Увеличение концентрации связанного билирубина в случае обтурационной желтухи обусловлено перенаполнением жёлчных путей вследствие закупорки, разрыва и в дальнейшем переходе компонентов жёлчи в кровь; при этом в крови накапливается связанный билирубин (гипербилирубинемия), из мочи исчезает уробилиноген, однако вследствие билирубинурии она приобретает тёмную окраску, а из кала исчезает стеркобилин. В клинико-биохимических лабораториях проводят определение содержания билирубина и его фракций для дифференциальной диагностики желтух.

ЛИТЕРАТУРА

1. Губський Ю.І. Біологічна хімія. – Київ-Тернопіль: Укрмедкнига, 2000. – С. 462-467.

2. Губський Ю.І. Біологічна хімія. Підручник. – Київ-Вінниця: Нова книга, 2007. – С. 577-584.

3. Гонський Я.І., Максимчук Т.П., Калинський М.І. Біохімія людини: Підручник. – Тернопіль: Укрмедкнига, 2002. – С. 562-566.

4. Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия. – М.: Медицина, 1998. – С. 506-508, 561-565.

5. Биохимия: Учебник / Под ред. Е.С. Северина. – М.: ГЭОТАР-МЕД, 2003. – С. 645-655.

6. Лабораторні та семінарські заняття з біологічної хімії: Навч. посібник для студентів вищих навч. закл. / Л.М. Вороніна, В.Ф. Десенко, А.Л. Загайко та ін. – Х.: Вид-во НФаУ; Оригінал, 2004. – С. 209-212.

ЗАНЯТИЕ 7

Тема: Биохимия почек и мочи. Физико-химические свойства и химический состав мочи в норме. Биохимическое исследование мочи.

Актуальность. Почки — один из важнейших органов, основное назначение которого заключается в поддержании динамического постоянства внутренней среды организма. Почки принимают участие в регуляции водно-электролитного баланса, кровяного давления, поддержке кислотно-щелоч-ного состояния, осмотического давления жидкостей организма; стимуляции эритропоэза и др. Почки вырабатывают мочу из компонентов плазмы крови. С мочой выделяется до 150 разных веществ. В суточной моче содержится в среднем около 40 г органических веществ и приблизительно 20 г неорганических. Биохимическое исследование мочи играет важную роль в клинике для диагностики и прогноза заболевания, контроля эффективности лечения.

Цель. Ознакомиться с основными физико-химическими свойствами мочи (диурез, рН, плотность, цвет, прозрачность, запах) и химическим составом нормальной мочи. Ознакомиться с методами клинического и биохимического анализа мочи. Запомнить некоторые физико-химические константы и биохимические показатели мочи в норме с целью использования их для диагностики заболеваний, правильной оценки отклонений от нормы.

ЗАДАНИЯ ДЛЯ САМОСТОЯТЕЛЬНОЙ РАБОТЫ

ТЕОРЕТИЧЕСКИЕ ВОПРОСЫ

1. Функции почек и особенности обмена веществ в них.

2. Биохимические механизмы регуляции функции почек.

3. Общие свойства и химический состав нормальной мочи. Значение исследования в клинике.

4. Органическое и неорганическое вещества нормальной мочи. Их изменения в зависимости от возраста.

5. Физико-химические показатели мочи: диурез, относительная плотность, рН, запах, цвет, прозрачность. Значение их исследования. Возможные отклонения от нормы.

6. Клинико-диагностическое значение количественного и качественного анализа мочи.

ТЕСТОВЫЕ ЗАДАНИЯ ДЛЯ САМОКОНТРОЛЯ

1. У спортсмена, который находился на диете с большим количеством белков, установлена кислая реакция мочи. Наличие каких веществ приводит к таким изменениям?

А.Хлориды и фосфаты. С.Фосфаты и сульфаты. В. Хлориды и сульфаты. D. Ураты и сульфаты. Е. Ураты и хлориды.

2. Прозрачность мочи является одним из параметров, которые оцениваются при её анализе. С наличием каких веществ может быть связано помутнение мочи, имеющей щелочную реакцию?

А. Фосфата кальция. В. Сульфата магния. С. Уратов. D. Хлоридов. Е. Солей аммиака.

3. Почки выполняют все функции, кроме:

А. Выделяют конечные продукты обмена. В. Регулируют водно-солевой обмен. С. Поддерживают осмотическое давление. D. Регулируют артериаль- ное давление крови. Е. Раскладывают мочевину на СО2 и Н2О.

4. Органоспецифическим ферментом почек является:

А. Лактатдегидрогеназа. В. Сукцинатдегидрогеназа. С. Аспартатаминотрансфераза. D. Трансамидиназа. Е. Креатинфосфокиназа.

5. В результате фильтрации плазмы крови в первичную мочу переходят все вещества, кроме:

А. Моносахаридов (глюкозы и фруктозы). В. Мочевины и мочевой кислоты. С. Низкомолекулярных белков. D. Креатина и креатинина. Е. Средне- и высокомоле- кулярных белков.

6. Поддержание постоянства рН в организме с помощью почек осуществляется в процессе реабсорбции ионов Na+ и секреции Н+. В основе их действия лежат все перечисленные химические процессы, за исключением:

A. Реабсорбция Na+ во время преобразования двузамещённых фосфатов
в однозамещённые.

B. Избирательное всасывание ионов Na+ в клетках канальцев взамен на
ионы Н+, идущих в просвет канальцев.

C. Диссоциация Н2СО3 на НСО3 и Н+, последний выводится из организма. D.Задержке ионов Na+ способствуют реакции образования аммиака и
использование его для нейтрализации кислых метаболитов.

E. Выведение мочевины с мочой.

7. Для диагностики заболевания мутную мочу с щелочной реакцией подкислили и подогрели. При этом осадок исчез. Чем обусловлена мутность мочи?

А. Слизь из мочевыводящих путей. В. Микрофлора, которая раскладывает мочевину с образованием аммиака. С. Гной из уретры. D. Белок почечного проис- хождения. Е. Фосфаты кальция и маг- ния, ураты.

8. Какой из физико-химических показателей мочи зависит от диуреза?

А. Цвет. В. рН. С. Относительная плотность.

D. Запах. Е. Прозрачность.

9. Какие из приведенных показателей рН и относительной плотности мочи взрослого человека отвечают норме?

А. рН=4,8; плотность 1,001. В. рН=8,0; плотность 1,040. С. рН=8,5; плотность 1,029. D. рН=3,5; плотность 1,020. Е. рН=6,0; плотность 1,021.

10. Как можно определить патологическое состояние взрослого человека, у которого наблюдается прекращение выделения мочи?

А. Энурез. В. Олигурия. С. Анурия. D. Никтурия. Е. Дизурия.

11. Как можно определить патологическое состояние взрослого человека, у которого суточный диурез составляет 500 мл?

А. Анурия. В. Полиурия. С. Никтурия. D. Олигурия. Е. Поллакиурия.

12. Содержание аммиака в моче является важным показателем кислотно-щелочного состояния организма; количество аммиака повышается как при респираторном, так и метаболическом ацидозе. Это связано со стимуляцией при ацидозе синтеза в клетках эпителия почечных канальцев ферментов:

 

А. Глутаминазы. В. Цикла Кребса. С. Карбоангидразы. D. АТФ-азы. Е. Гиалуронидазы.

13. Больной, 45 лет, жалуется на неутолимую жажду, потребление большого количества жидкости (до 5 л), выделение значительного количества мочи (до 6 л в сутки). Концентрация глюкозы в крови составляет 4,4 ммоль/л, уровень кетоновых тел не повышен. Моча неокрашена, удельный вес 1,002; сахар в моче не определяется. Дефицит какого гормона может привести к таким изменениям?

A. Глюкагона. B. Альдостерона. C. Инсулина. D. Вазопрессина.

14. При лабораторном исследовании ребёнка выявлено повышенное содержание в моче лейцина, валина, изолейцина и их кетопроизводных. Моча имеет характерный запах кленового сиропа. Недостаточностью какого фермента вызваны данные изменения?

А. Дегидрогеназы α-кетокислот. В. Аминотрансферазы. С. Глюкозо-6-фосфатазы. D. Фосфофруктокиназы. Е. Фосфофруктомутазы.

ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА




Источник: infopedia.su


Добавить комментарий